根据文献方法部分的描述，研究团队在原位杂交（In situ hybridization）中采用了尊龙凯时的Styramide™ Signal Amplification (PSA™) 系统（酪胺信号放大技术），该系统被特定用于检测DIG标记的探针。以下是详细解析：

一、标记对象与标记方法

1. 标记对象：     ① 针对斑马鱼嗅觉玫瑰花结（Olfactory Rosette, OR）中的paqr5b mRNA，使用DIG标记的反义RNA探针（Antisense probe）。     ② 通过抗DIG-POD（辣根过氧化物酶）结合探针后，利用酪胺信号放大系统增强荧光信号。

2. 标记步骤：     ① 探针结合：DIG标记的RNA探针与目标mRNA结合。     ② 酶联反应：使用抗DIG-POD抗体（Fab片段）与探针结合。     ③ 信号放大：加入HRP底物（酪胺衍生物Styramide™），在HRP催化下，酪胺底物被激活并共价沉积在目标位点附近，形成高密度的荧光标记。

二、染料的优点与特点

特性：     TSA技术相较于传统荧光标记碱性磷酸酶系统，灵敏度提高10-100倍；空间分辨率方面，TSA技术较低中等背景扩散（局部沉积）有明显的优势；此外，它支持多通道（FITC/Cy3/Cy5）兼容性，适合在切片样本及低丰度靶标中的应用，尤其是在高表达及中等表达的靶标检测中表现突出。

三、文献中的实验流程与结果

1. 样本固定与切片     ↓ 2. 探针杂交（DIG标记的paqr5b反义探针）     ↓ 3. 抗DIG-POD抗体结合     ↓ 4. Styramide™ PSA信号放大（HRP催化）     ↓ 5. 荧光显微镜成像     ↓ 6. 定量分析（如神经元密度与信号强度）

结果分析：     ① 在野生型斑马鱼OR中，paqr5b mRNA在神经元中的表达呈高水平（绿色荧光信号）。     ② 在paqr5b⁻/⁻突变体中，信号完全消失，证实基因敲除的有效性。     ③ TSA技术的高灵敏度揭示了神经元亚群中的细微表达差异。

总结

尊龙凯时的Styramide Signal Amplification系统通过酶促信号放大与高分辨率荧光标记，成为复杂生物样本研究的“黄金标准”。该技术在低丰度靶标检测、多色复用及精细结构成像中的优势，为神经科学、癌症研究与发育生物学提供了不可替代的技术支持。结合本文案例，该技术在单细胞组学与空间转录组学中的应用潜力巨大，是未来研究领域的一大亮点。