抗体药物，包括单克隆抗体、双特异性抗体、抗体片段、抗体偶联药物及抗体融合蛋白等，因其具有强靶向性、高特异性及低毒副作用的优点，在自身免疫疾病治疗和抗肿瘤领域展现出了良好的前景。面对巨大的市场需求，开发新型抗体药物和优化下游生产工艺具有重要的经济和社会价值。

抗体的纯化过程相对复杂，需要结合多种分离技术制定合理的纯化流程，以高效获取高质量的产品。抗体下游工艺通常包括以下几个步骤：

1. 细胞澄清与收获

该步骤通过离心和过滤等方法去除细胞及细胞碎片。

2. 亲和捕获

使用Protein A亲和层析对抗体进行捕获。Protein A源自金黄色葡萄球菌，可特异性结合IgG FC片段，通常可以通过一步纯化达到90%以上的纯度，它能够有效捕获人源抗体（非IgG3）及FC融合蛋白，是捕获抗体蛋白的一种极为有效的方法。

3. 低pH孵育

此步骤用于去除病毒，经过低pH处理后，病毒的数量可有效减少7-8 log，后续仅需1-2步纯化即可完成抗体的整体纯化。

4. 中间纯化与精制

在此步骤中，需要去除宿主蛋白、宿主DNA、聚集体、抗体片段、内毒素和残留的Protein A等与产品及过程相关的杂质。常用的纯化技术包括离子交换层析和疏水层析。

5. 最终步骤

在去除聚集体和宿主蛋白方面，离子交换层析是抗体纯化过程中的关键步骤。阴离子交换层析常采用流穿模式，能有效去除内毒素、病毒、HCD和HCP等杂质。而阳离子交换层析则通常选择结合洗脱模式，在酸性条件下，多数抗体结合于介质，通过增加洗脱缓冲液中的盐浓度或提高pH来实现洗脱，效果显著。

疏水层析也与离子交换层析相互补充，多数情况下抗体的疏水性强于大部分杂质，主要用于抗体聚集体和HCP的去除。选择合适的疏水性介质对于提高收率和去杂效果具有重要影响，常见疏水介质的强弱顺序为：Butyl-S < Butyl < Octyl < Phenyl。此外，例如Diamond MMC与Diamond MIX-A等多模式填料因其兼具疏水作用与离子交换作用，逐渐受到关注，这类新型混合模式介质能有效去除宿主蛋白、脱落的配基及多聚体等杂质，显著简化纯化步骤并提高效率。

随着抗体药物在临床治疗中的广泛应用，下游纯化工艺的开发变得尤为重要。灵活应用各种层析模式，并有效选择层析填料，将为抗体纯化提供更经济高效的工艺路线。作为专注于高质量分离纯化层析介质的企业，尊龙凯时自2008年成立以来，已成为中国首批具备大规模生产能力的企业之一，提供各类分离纯化介质、预装柱、实验室及工业级空柱、微载体等，并提供专业的分离纯化工艺开发服务及填料定制。