尊龙凯时提供的试剂盒仅供科学研究使用,禁止用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。试验步骤如下:
试剂盒原理
首先,在涂覆有adropin(AD)抗体的微孔中依次加入待测样本、标准品,以及HRP标记的检测抗体。经过适当的温育后,彻底清洗每个微孔,确保去除未结合的成分。
接着,加入底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下会转变为蓝色,随后在酸性条件下转变为黄色。显色的强度与样本中adropin(AD)的浓度呈正相关。
最后,使用酶标仪在450nm波长下测定样品的吸光度(OD值),以计算样品的浓度。
试剂盒组成
- 微孔酶标板
- 标准品(0、25、50、100、200、400pg/mL)
- 样本稀释液
- 检测抗体-HRP
- 20×洗涤缓冲液
- 底物A、B
- 终止液
- 封板膜
- 使用说明书
- 自封袋
样品收集及处理
样品收集应遵循以下步骤:
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,轻轻收集血液并在3000转/分钟下离心10分钟,分离血清与红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理,离心后取上清。
- 细胞上清液:轻轻离心去除颗粒及聚合物。
- 组织匀浆:将组织与生理盐水混合后捣碎并离心。
如未及时检测样品,请按单次用量分装并在-20℃下冷冻保存,避免反复冻融。
操作注意事项
在操作试剂时请遵循以下建议:
- 从冷藏环境中取出的试剂应在室温下平衡15-30分钟后再使用。
- 洗涤液如出现结晶,稀释时可加热帮助溶解。
- 使用加样器进行各步加样,并确保其准确性。
- 每次测定应同时制作标准曲线,以确保结果的准确性。
- 请勿重复使用封板膜,以避免交叉污染。
所有的试剂和样品均应按传染处理,确保操作人员的安全与健康。 尊龙凯时致力于为科研提供优质的产品与服务,欢迎咨询我们的销售经理或在线客服,了解更多信息。