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尊龙凯时猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒使用说明

发布时间:2025-02-16   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时推出的猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法)是用于检测猪蓝耳病病毒的专业工具,具有重要的临床应用价值。产品名称为猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法),英文名称为Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Detection Kit(Real-Time PCR Method),每盒包装规格为50T。

尊龙凯时猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒使用说明

本试剂盒采用实时荧光PCR技术,通过特异性引物和探针,针对猪蓝耳病病毒的保守区域进行定性检测。PCR反应过程中,若样本中存在猪蓝耳病病毒基因组模板,则会产生荧光信号,通过荧光定量PCR仪实时监测,从而实现对感染状态的判定。

试剂盒组成

本试剂盒包含以下组分:

  • PRRSV RT-PCR反应液:875 μL × 1管
  • PRRSV混合酶液:125 μL × 1管
  • PRRSV阳性对照:40 μL × 1管
  • PRRSV阴性对照:40 μL × 1管
  • 说明书:1份
注:阴性对照为灭菌纯水,阳性对照为含猪蓝耳靶基因的质粒。

储存条件及有效期

本试剂盒需避光保存于-20℃以下,避免反复冻融,保质期为12个月。

适用仪器

本试剂盒可用于ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列及杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪器。

样本要求

1. 血液或血清样品:使用无菌注射器收集样本并置于离心管中待检。
2. 肺脏、淋巴结和脾脏样品:取20g样本,加少量灭菌PBS研磨并稀释成乳剂,然后进行离心处理。
3. 避免样本间交叉污染。
4. 样本收集后应及时检测,若无法立即检验,可在2-8℃冷藏保存;长期保存在-80℃以下并避免反复冻融。

检验方法

1. 试剂准备:从冰箱中取出试剂盒,充分融化试剂并瞬时离心去除附着液体。
2. 样本准备:使用QIAGEN或Roche RNA提取试剂盒提取RNA,操作按照说明书进行。
3. 加样:在PCR反应管中加入5μL待测样本RNA,终体积25μL,混匀后转移至PCR仪器。
4. PCR扩增:设置仪器参数并进行PCR扩增,确保在FAM通道采集信号。

参考值

1. 阳性对照应显示典型的扩增曲线或Ct值≤35;阴性对照的Ct值应>38或无Ct值。
2. 标本检测结果:

  • 阳性:Ct值≤35或有明显指数增长期。
  • 可疑:Ct值在35-38之间,需重复检测。
  • 阴性:Ct值>38或无Ct值。

注意事项

1. 实验室应严格遵循国家基因扩增检验实验室管理规范进行管理。
2. 样本处理过程中应在0-4℃条件下操作,并确保器具消毒。
3. 不同区域物品不得交叉使用,完成实验后应及时清洁工作台。
4. 使用后应将废弃物按规定处理,确保实验室安全。

通过使用尊龙凯时的猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒,您将能够有效地进行猪蓝耳病病毒检测,为疫病的预防与控制提供有力支持。